简要描述:
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:1109
商品详情:
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒测定意义:
MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3229 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3229-1 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 |
测定原理:
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。
过氧化酶7ELISA试剂盒 GPX7免费代测试剂
过氧化酶5ELISA试剂盒 GPX5免费代测试剂
过氧化酶4ELISA试剂盒 GPX4免费代测试剂
S转移酶μ2ELISA试剂盒 GSTμ2免费代测试剂
S转移酶κ1ELISA试剂盒 GSTκ1免费代测试剂
S转移酶α5ELISA试剂盒 GSTα5免费代测试剂
S转移酶α2ELISA试剂盒 GSTα2免费代测试剂
谷丙转氨酶2ELISA试剂盒 ALT2免费代测试剂
酰肽环转移酶ELISA试剂盒 QPCT免费代测试剂
果糖-6-磷转氨酶2ELISA试剂盒 GFPT2免费代测试剂
脱羧酶样蛋白1ELISA试剂盒 GADL1免费代测试剂
脱氢酶2ELISA试剂盒 GLUD2免费代测试剂
受体相互作用蛋白1ELISA试剂盒 GRIP1免费代测试剂
丰富蛋白ELISA试剂盒 GRP免费代测试剂
谷氨氨肽酶ELISA试剂盒 GluAP免费代测试剂
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒碳酐酶(CA)测试盒/微量法100管/96样
糖化酶(Glucoamylase)测试盒/分光光度法50管/24样
糖化酶(Glucoamylase)测试盒/微量法100T/48S
糖化血红蛋白(GHb)测试盒/比色法15管/14样
糖化血清蛋白(GSP)测试盒/果糖胺法25管/24样
糖化血清蛋白(GSP)测试盒/果糖胺法50管/48样
糖化血清蛋白(GSP)测试盒/微板法96T
糖原含量测试盒/分光光度法50管/48样
糖原含量测试盒/微量法100管/96样