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柠檬酸合酶(CS)测试盒

简要描述:

柠檬酸合酶(CS)测试盒广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。

更新时间:2024-04-09;厂商性质:经销商;览量:737

商品详情:
柠檬酸合酶(CS)测试盒测定意义:                          

CS(EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。

货号

规格

检测方法

YSH3373

100管/48样

微量法

YSH3373-1

50管/24样

可见分光光度法

YSH3373-1

25管/12样

可见分光光度法


测定原理:

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰fu酶A,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
样品中AA提取:

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。

G抗原8ELISA试剂盒 GAGE8免费代测试剂

G抗原7ELISA试剂盒 GAGE7免费代测试剂

G抗原6ELISA试剂盒 GAGE6免费代测试剂

G抗原5ELISA试剂盒 GAGE5免费代测试剂

G抗原4ELISA试剂盒 GAGE4免费代测试剂

G抗原3ELISA试剂盒 GAGE3免费代测试剂

G抗原13ELISA试剂盒 GAGE13免费代测试剂

G抗原10ELISA试剂盒 GAGE10免费代测试剂

G抗原1ELISA试剂盒 GAGE1免费代测试剂

G底物ELISA试剂盒 GSBS免费代测试剂

G蛋白偶联受体家族C5组成员AELISA试剂盒 GPRC5A免费代测试剂

G蛋白偶联受体78ELISA试剂盒 GPR78免费代测试剂

G蛋白偶联受体37ELISA试剂盒 GPR37免费代测试剂

G蛋白α抑制活性多肽3ELISA试剂盒 GNαI3免费代测试剂

G补缀FHA域血管生成因子1ELISA试剂盒 AGGF1免费代测试剂
柠檬酸合酶(CS)测试盒50管/24样二胺氧化酶(DAO)测试盒/分光光度法

100T/48S二胺氧化酶(DAO)测试盒/微量法

50管/48样二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒/分光光度法

25管/24样二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒/分光光度法

100管/96样二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒/微量法

50管/24样二氢黄酮chun还原酶(DFR)测试盒/分光光度法

100管/48样二氢黄酮chun还原酶(DFR)测试盒/微量法

50管/24样二糖酶测定试剂盒(蔗糖酶)/比色法

50管/24样二糖酶测试盒(测麦芽糖)/比色法


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