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ELISA试剂盒进口大鼠实验条件的选择很重要
更新时间:2018-04-09   点击次数:839次

ELISA试剂盒进口大鼠试验时,注意事项如下:

1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

2在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4)ELISA试剂盒进口大鼠酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
Chlorzoxazone    350mg    氯唑沙宗标准品    95-25-0
Cholecalciferol (Vitamin D3)    30mg×mpules    维生素D3标准品    67-97-0
Cholesteryl Caprylate    200mg    胆固醇辛酸酯标准品    1182-42-9
Cholestyramine Resin    500mg    考来烯胺树脂标准品    11041-12-6
Cholic Acid (AS)    2g    胆酸标准品    81-25-4
Choline Bitartrate    200mg    重酒石酸胆碱标准品    87-67-2
Choline Chloride    200mg    氯化胆碱标准品    67-48-1
Chromium Picolinate    100mg    吡啶甲酸铬标准品    
Ciclopirox    50mg    环吡酮标准品    29342-05-0
Ciclopirox Olamine    125mg    环砒酮胺标准品    41621-49-2
ELISA试剂盒进口大鼠

 

 

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