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本公司大肠菌群快速纸片检测试剂盒说明书
更新时间:2011-07-25   点击次数:1058次

【包装规格】60份/盒 共180张
【预期用途】用于大肠菌群的检测
【检验原理】应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基,细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖,大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的Formazane产生红色色素,即大肠菌在纸片培养上呈红菌落,菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。
【储存条件及有效期】2℃~8℃保存 有效期12个月
【标本处理】
1、样品处理:液体样品按国标方法进行;固体样品,取25g样品,研碎加入25ml灭菌盐水混匀。
2、接种:液体样品吸取三个1mL分别涂布于三疑于三张纸片,再吸取1︰10、1︰100稀释液各三个1ml,分别涂布于三张纸片。固体样品,吸取1︰1混悬液三个1mL(1g)分别涂布于三张纸片,再吸取1︰10、1︰100稀释液各三个1ml,分别涂布于三张纸片,而后用手轻轻压平,置36±1℃温箱,培养15小时观察结果。
【检验方法】将接种好的纸片,袋口朝上,竖直放置于37℃培养箱中培养12~18小时。
【结果判断】
1、 纸片上出现紫红色菌落,其周围有黄圈者为阳性。
2、 纸片为一种颜色,无菌落生长者为阴性。
3、 纸片呈紫色,有紫红色菌落,其周围无黄圈者为阴性。
4、 酸性食品接种后,纸片变黄,经培养后无紫红色菌落为阴性。
5、 纸片变色呈现不典型菌落,结果可疑者,应做复发酵进验证。
【结果报告】根据纸片的阳性片数,查对大肠菌群MPN检索表,报告之。
【注意事项】
1、应避光低温(10℃以下)保存,并注意防潮,如发现纸片变为粉红色即为失效。
2、检查酸性食品时,需用10%无菌碳酸钠溶液调PH至中性后,再检测。
3、可疑结果的判断:
大肠菌群量的多少与结果的显示密切相关,可出现3种不同现象:⑴菌量较大(≥103cfu/ml),整个纸片变黄而又无红色斑点(或红晕);⑵菌量适中(102~103 cfu/ml),整个纸片也变黄,但有小而密集的红色斑点;⑶菌量较少(≤102cfu/ml),纸片可呈紫蓝色,并有散在或较密集的红色斑点,其周围变黄。因此菌量较大时,可能出现可疑现象。此时应通过加大样品稀释度或进一步做复发酵进行证实。其它可疑现象也可通过发酵实验进行确认。
确认试验的方法:进行确认试验,用灭菌摄子无菌操作将可疑纸片移种到乳糖发酵管里,置37℃24小时培养后,对其产酸产气者判为大肠菌群阳性,否则判为阴性。

 

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