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酶联免疫吸附法(ELISA)
发布时间:2019-03-27   点击次数:147次

酶联免疫吸附法(ELISA)
原理:人elisa试剂盒批发可用于测定抗体,也可用于检测杭原。其基本原理是采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。3种必要的试剂: ①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂); ②酶标记的抗原或抗体(标记物); ③酶作用的底物(显色剂)。

ELISA过程包括:抗原吸附在固相载体上,这个过程称为包被,加待测抗体, 再加相应酶标记抗体,生成抗原--待测抗体--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。

根据检测目的和操作步骤不同,有以下三种类型的常用方法:

a、间接法  
此法是测定抗体zui常用的方法。将已知抗原吸附于固相载体。加人待检标本(含相应抗体)与之结合。洗涤后,加人酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。

b、双抗体夹心法  
此法常用于测定抗原。将已知抗体吸附于固相载体,加人待检标本(含相应抗原)与之结合。温育后洗涤,加人酶标板中。

c、竞争法  
此法可用于抗原和半抗原的定量测定,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,将特异性抗体吸附于固相载体。加入待测抗原和一定量的酶标已知抗原,使二者竟争与固相抗体结合;经过洗涤分离,zui后结合于固相的酶标抗原与待测抗原含量呈负相关。

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