技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 人elisa试剂盒批发免疫测定技术的操作方法
人elisa试剂盒批发免疫测定技术的操作方法
发布时间:2018-09-18   点击次数:98次

      人elisa试剂盒批发免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的确诊试剂离不开优质的质料,如抗原抗体,酶等。曾经用于免疫测定的抗原一般为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和运用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的符号物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,跟着分子生物学的展开,运用基因工程方法制备各种特别的。

操作方法:
双抗体夹心法:
1、包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 
隔夜。次日,弃去孔内溶液,用洗刷缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗刷,下同)。
2、加样:加必定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗刷。(一同做空白孔,阴性对照孔及
阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,参与新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗刷。
4、加底物液显色:于各反应孔中参与暂时制作的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、中止反应:于各反应孔中参与2M硫酸0.05ml。
6、效果断定:可于白色布景上,直接用肉眼查询效果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号标明。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规则的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

在线客服
 

中国化工仪器网

中级会员

中级会员

8

推荐收藏该企业网站