肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒

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肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶将酰基转移至L-肉毒碱的反应，在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。

测定原理：

基于肉碱和脂酰辅酶在丙二酰辅酶存在与否的条件下，通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用，产生脂酰肉碱，并释放出巯基辅酶(COA-SH)，与Ellman试剂DN-TB反应后，产生黄色的TNB。通过其吸收峰值得变化(412nm)，来定量分析CPT-1的活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

信号素3GELISA试剂盒 SEMA3G免费代测试剂

信号素3FELISA试剂盒 SEMA3F免费代测试剂

信号素3DELISA试剂盒 SEMA3D免费代测试剂

信号素3BELISA试剂盒 SEMA3B免费代测试剂

信号淋巴细胞激活分子家族成员7ELISA试剂盒 SLAMF7免费代测试剂

信号传导转录激活因子5BELISA试剂盒 STAT5B免费代测试剂

信号传导转录激活因子5AELISA试剂盒 STAT5A免费代测试剂

信号传导转录激活因子2ELISA试剂盒 STAT2免费代测试剂

信号传导转录激活因子1ELISA试剂盒 STAT1免费代测试剂

锌指同源框蛋白4ELISA试剂盒 ZFHX4免费代测试剂

心脏肌球蛋白结合蛋白CELISA试剂盒 MYBPC3免费代测试剂

心磷脂酰基转移酶1ELISA试剂盒 LCLAT1免费代测试剂

心磷脂合酶ELISA试剂盒 CLS免费代测试剂

心肌型兰尼定受体2ELISA试剂盒 RYR2免费代测试剂

心肌素ELISA试剂盒 MYOCD免费代测试剂
肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒淀粉比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

直链淀粉比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

直链淀粉比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

支链淀粉比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

支链淀粉比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

α比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样

α比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样

β比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样

β比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样