简要描述:
乙醇脱氢酶(ADH)测试盒是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:1006
乙醇脱氢酶(ADH)测试盒
商品详情:
测定意义:
ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3507 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3507-1 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 |
测定原理:
ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+,NADH在340nm处有吸收峰,而NAD+没有;测定340nm 吸光度下降速率,来计算ADH活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
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果糖比色法检测试剂盒 微量法100管/96样
果糖比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
蔗糖比色法检测试剂盒 微量法100管/96样
蔗糖比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
蔗糖酶比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样
蔗糖酶比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样
蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。