简要描述:
线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:837
线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒
商品详情:
测定意义:
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多ᵟ茀ᵟ
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3486 | 100管/96样 | 荧光法 |
测定原理:
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFH,DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述测定原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品:
多功ᵟ茀ᵟ
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
白介素12受体亚基β-1ELISA试剂盒 IL12RB1/IL12R/IL12RB免费代测试剂
白介素12受体ELISA试剂盒 IL-12R免费代测试剂
白喉抗体ELISA试剂盒 Diphtheria Ab免费代测试剂
靶向核糖核酶ELISA试剂盒 TR免费代测试剂
八聚体转录因子ELISA试剂盒 OTF2A免费代测试剂
艾柯病毒IgMELISA试剂盒 ECHO IgM免费代测试剂
艾柯病毒IgGELISA试剂盒 ECHO IgG免费代测试剂
癌症促凝素ELISA试剂盒 CP免费代测试剂
癌胚铁蛋白ELISA试剂盒 CEF免费代测试剂
癌抗原27-29ELISA试剂盒 CA 27-29免费代测试剂
癌蛋白诱导转录物3ELISA试剂盒 OIT3免费代测试剂
阿米巴ELISA试剂盒 Amebiasis免费代测试剂
阿拉伯半乳糖蛋白ELISA试剂盒 AGPs免费代测试剂
吖啶橙ELISA试剂盒 AO免费代测试剂
ω干扰素ELISA试剂盒 IFN-ω/IFNB免费代测试剂
线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒共价结合型果胶(CSP)含量测试盒50管/24样 可见分光光度法
原果胶含量测试盒100管/48样 微量法
原果胶含量测试盒50管/24样 可见分光光度法
半乳糖醛含量测试盒100管/96样 微量法
半乳糖醛含量测试盒50管/48样 可见分光光度法
果胶甲酯化程度测试盒100管/96样 微量法
果胶甲酯化程度测试盒50管/48样 可见分光光度法
果胶酶测试盒100管/48样 微量法
果胶酶测试盒50管/24样 可见分光光度法
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。