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总巯基测试盒

简要描述:

总巯基测试盒主要包括巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。

更新时间:2023-08-22;厂商性质:经销商;览量:406

商品详情:
总巯基测试盒测定意义:

 

生物体内巯基主要包括胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。

 

测定原理:

 

巯基基团与5,5’-二硫代-双-甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有最大吸收峰。

 

自备实验用品:

 

天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃避光保存。临用前加入667μL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入9.333 mL蒸馏水混匀,避光保存。

试剂四:粉剂×1管,4℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水,充分溶解。

标准品:粉剂×1瓶,临用前加10 mL蒸馏水,充分溶解。1μmol/mL标准液,4℃避光保存。
商品属性:

货号

规格

检测方法

YSH3562

100管/48样

微量法

YSH3562-1

50管/24样

可见分光光度法


测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到570 nm,蒸馏水调零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸馏水,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A空白管。显色后务必在30min内测完。

3. 标准管:取EP管,加入10μL标准品,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A标准管。显色后务必在30min内测完。

4. 测定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A测定管。显色后务必在30min内测完。

注意:空白管和标准管只需要测定一次。

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