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线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒

简要描述:

线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

更新时间:2024-04-09;厂商性质:经销商;览量:755

商品详情:
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒测定意义:

CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

配合测定酸含量、酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)酸含量和酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析酸含量、酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。

货号

规格

检测方法

YSH3487

100管/96样

微量法

YSH3487-1

50管/48样

紫外分光光度法

YSH3487-1

25管/24样

紫外分光光度法


测定原理:

CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。
样品中AA提取:

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。

核糖核酶A12ELISA试剂盒 RNASE12免费代测试剂

核糖核酶A11ELISA试剂盒 RNASE11免费代测试剂

核糖核酶A10ELISA试剂盒 RNASE10免费代测试剂

核糖核酶ⅢELISA试剂盒 RNASEN免费代测试剂

核外切酶1ELISA试剂盒 EXO1免费代测试剂

核受体相关蛋白1ELISA试剂盒 NURR1免费代测试剂

核仁磷蛋白3ELISA试剂盒 NPM3免费代测试剂

核仁磷蛋白2ELISA试剂盒 NPM2免费代测试剂

核仁蛋白9ELISA试剂盒 NOL9免费代测试剂

核仁蛋白8ELISA试剂盒 NOL8免费代测试剂

核仁蛋白7ELISA试剂盒 NOL7免费代测试剂

核仁蛋白6ELISA试剂盒 NOL6免费代测试剂

核仁蛋白58ELISA试剂盒 NOP58免费代测试剂

核仁蛋白4ELISA试剂盒 NOL4免费代测试剂

核仁蛋白3ELISA试剂盒 NOL3免费代测试剂
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒/分光光度法50管/48样

肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒/微量法100管/96样

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒/分光光度法50管/48样

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒/微量法100管/96样

肉桂-4-羟化酶(C4H)测试盒/分光光度法50管/48样

肉桂-4-羟化酶(C4H)测试盒/微量法100管/96样

(LD)测试盒(测全血)/比色法50管/48样

(LD)测试盒(测血清、组织)/比色法50管/48样

乳含量(LA)测试盒/分光光度法50管/24样


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