简要描述:
琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:863
商品属性:
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3329 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3329-1 | 50管/48样 | 可见分光光度法 |
商品详情:
琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒测定意义
SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
测定原理
SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃避光保存。临用前加入667μL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入9.333 mL蒸馏水混匀,避光保存。
试剂四:粉剂×1管,4℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水,充分溶解。
标准品:粉剂×1瓶,临用前加10 mL蒸馏水,充分溶解。1μmol/mL标准液,4℃避光保存。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到570 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸馏水,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A空白管。显色后务必在30min内测完。
3. 标准管:取EP管,加入10μL标准品,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A标准管。显色后务必在30min内测完。
4. 测定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A测定管。显色后务必在30min内测完。
注意:空白管和标准管只需要测定一次。
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