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碱性蛋白酶测试盒

简要描述:

碱性蛋白酶测试盒是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。

更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:1083

商品详情:
碱性蛋白酶测试盒测定意义:

AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。

货号

规格

检测方法

YSH3337

100管/48样

微量法

YSH3337-1

50管/24样

可见分光光度法

测定原理:

在碱性条件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨;在碱性条件下,酪氨还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。
样品中AA提取:

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。

RAB11家族相互作用蛋白3ELISA试剂盒 RAB11FIP3免费代测试剂

PTB结合核蛋白2ELISA试剂盒 RAVER2免费代测试剂

Protogenin蛋白ELISA试剂盒 PRTG免费代测试剂

Prominin2蛋白ELISA试剂盒 PROM2免费代测试剂

Prominin1蛋白ELISA试剂盒 PROM1免费代测试剂

Prestin蛋白ELISA试剂盒 PRES免费代测试剂

Preptin蛋白ELISA试剂盒 Preptin免费代测试剂

POTE锚蛋白域家族成员GELISA试剂盒 POTEG免费代测试剂

Polycomb组环指蛋白4ELISA试剂盒 PCGF4免费代测试剂

Polybromo1蛋白ELISA试剂盒 PBRM1免费代测试剂

POLQ样蛋白解旋酶ELISA试剂盒 HELQ免费代测试剂

Pirin蛋白ELISA试剂盒 PIR免费代测试剂

Pim-3原癌基因ELISA试剂盒 PIM3免费代测试剂

Pim-2原癌基因ELISA试剂盒 PIM2免费代测试剂

Pim-1原癌基因ELISA试剂盒 PIM1免费代测试剂
碱性蛋白酶测试盒50管/48样γ谷氨酰半连接酶(GCL)测试盒/分光光度法

100T/96Sγ谷氨酰半连接酶(GCL)测试盒/微量法

50管/48样γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)测试盒/分光光度法

100T/96Sγ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)测试盒/微量法

50管/24样-N-去甲基化酶(AND)测试盒/分光光度法

100管/48样-N-去甲基化酶(AND)测试盒/微量法

50管/48样氨基(AA)含量测试盒/分光光度法

100T/96S氨基(AA)含量测试盒/微量法

100管/96样白蛋白(ALB)测试盒/比色法


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