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乙酸激酶(ACK)测试盒

简要描述:

乙酸激酶(ACK)测试盒主要存在于微生物中,催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是细菌碳代谢和能量代谢的关键酶,尤其是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。

更新时间:2024-04-09;厂商性质:经销商;览量:864

商品详情:
乙酸激酶(ACK)测试盒测定意义:                          

ACK主要存在于微生物中,催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是细菌碳代谢和能量代谢的关键酶,尤其是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。

测定原理:

(1)ACK催化乙酸钠和ATP生成乙酰磷酸和ADP,(2)酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和酸,(3)乳酸脱氢酶催化酸和NADH生成乳酸和NAD+,(4)在340nm下测定NADH氧化生成NAD+速率,即可反映ACK活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃避光保存。临用前加入667μL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入9.333 mL蒸馏水混匀,避光保存。

试剂四:粉剂×1管,4℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水,充分溶解。

标准品:粉剂×1瓶,临用前加10 mL蒸馏水,充分溶解。1μmol/mL标准液,4℃避光保存。
商品属性:

货号

规格

检测方法

YSH3509

100管/96样

微量法

YSH3509-1

50管/48样

紫外分光光度法


测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到570 nm,蒸馏水调零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸馏水,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A空白管。显色后务必在30min内测完。

3. 标准管:取EP管,加入10μL标准品,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A标准管。显色后务必在30min内测完。

4. 测定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A测定管。显色后务必在30min内测完。

注意:空白管和标准管只需要测定一次。

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