简要描述:
肉桂酸4羟化酶(C4H)测试盒又称反式肉桂酸-4-单氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌类中,该酶催化肉桂酸羟化作用产生4-香豆酸盐,是苯丙烷途径中继L-苯丙解氨酶之后的第二个关键酶。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:930
商品属性:
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3389 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3389-1 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 |
商品详情:
肉桂酸4羟化酶(C4H)测试盒测定意义:
C4H又称反式肉桂酸-4-单氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌类中,该酶催化肉桂酸羟化作用产生4-香豆酸盐,是苯丙烷途径中继L-苯丙氨解氨酶之后的第二个关键酶。
测定原理:
C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸盐和NADPH,在340nm下测定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃避光保存。临用前加入667μL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入9.333 mL蒸馏水混匀,避光保存。
试剂四:粉剂×1管,4℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水,充分溶解。
标准品:粉剂×1瓶,临用前加10 mL蒸馏水,充分溶解。1μmol/mL标准液,4℃避光保存。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到570 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸馏水,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A空白管。显色后务必在30min内测完。
3. 标准管:取EP管,加入10μL标准品,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A标准管。显色后务必在30min内测完。
4. 测定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A测定管。显色后务必在30min内测完。
注意:空白管和标准管只需要测定一次。
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