简要描述:
转氢酶1测试盒位于线粒体的内膜上,又称为呼吸电子传递链复合体六,催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互转化。催化正向反应称为TH-1。线粒体NADH含量增加时会导致线粒体膜的H+电化学梯度升高,因而促进了电子传递链上ROS的产生。TH-1促进NADH转换为NADPH,从而提高线粒体的抗氧化能力。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:1063
转氢酶1测试盒
商品详情:
测定意义:TH位于线粒体的内膜上,又称为呼吸电子传递链复合体六,催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互转化。催化正向反应称为TH-1。线粒体NADH含量增加时会导致线粒体膜的H+电化学梯度升高,因而促进了电子传递链上ROS的产生。TH-1促进NADH转换为NADPH,从而提高线粒体的抗氧化能力。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3556 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3556-1 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 |
测定原理:NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代NADP+,TH-1催化 APADP+还原生成的APADPH在375nm有特征光吸收,因此通过测定375nm光吸收增加速率,来计算TH-1活性。需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
角化蛋白ELISA试剂盒 CNFN免费代测试剂
角化不良蛋白ELISA试剂盒 DKC免费代测试剂
角蛋白81ELISA试剂盒 KRT81免费代测试剂
角蛋白8ELISA试剂盒 KRT8免费代测试剂
角蛋白7ELISA试剂盒 KRT7免费代测试剂
角蛋白6CELISA试剂盒 KRT6C免费代测试剂
角蛋白6BELISA试剂盒 KRT6B免费代测试剂
角蛋白6AELISA试剂盒 KRT6A免费代测试剂
角蛋白5ELISA试剂盒 KRT5免费代测试剂
角蛋白40ELISA试剂盒 KRT40免费代测试剂
角蛋白4ELISA试剂盒 KRT4免费代测试剂
角蛋白33AELISA试剂盒 KRT33A免费代测试剂
角蛋白3ELISA试剂盒 KRT3免费代测试剂
角蛋白20ELISA试剂盒 KRT20免费代测试剂
角蛋白2ELISA试剂盒 KRT2免费代测试剂
转氢酶1测试盒-N-脱甲基酶(ERND)测试盒/微量法100T/48S
琥珀脱氢酶(SDH)测试盒/比色法50管/48样
琥珀脱氢酶(SDH)测试盒/分光光度法50管/48样
琥珀脱氢酶(SDH)测试盒/微量法100管/96样
花青素还原酶(ANR)测试盒/分光光度法50管/48样
花青素还原酶(ANR)测试盒/微量法100管/96样
氧化酶(XOD)测试盒/比色法50T/48样
氧化酶(XOD)测试盒/分光光度法50管/48样
氧化酶(XOD)测试盒/微量法100管/96样
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。