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糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒

简要描述:

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒)是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。

更新时间:2023-08-26;厂商性质:经销商;览量:620

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒

商品详情:
测定意义:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。

货号

规格

检测方法

YSH3411

100管/48样

微量法

YSH3411-1

50管/24样

紫外分光光度法

测定原理:

GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取:

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

Ⅱ类主要组织相容性复合体DQβ1ELISA试剂盒 MHCDQβ1免费代测试剂

Ⅰ类主要组织相容性复合体GELISA试剂盒 MHCG免费代测试剂

Ⅰ类主要组织相容性复合体EELISA试剂盒 MHCE免费代测试剂

Ⅰ类主要组织相容性复合体CELISA试剂盒 MHCC免费代测试剂

9kDa信号识别颗粒ELISA试剂盒 SRP9免费代测试剂

98kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP98免费代测试剂

93kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP93免费代测试剂

8-羟基鸟糖苷酶1ELISA试剂盒 OGG1免费代测试剂

88kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP88免费代测试剂

85kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP85免费代测试剂

7-脱氢还原酶ELISA试剂盒 DHCR7免费代测试剂

70kDa热休克蛋白结合蛋白1ELISA试剂盒 HSPBP1免费代测试剂

70kDa热休克蛋白9ELISA试剂盒 HSPA9免费代测试剂

70kDa热休克蛋白4ELISA试剂盒 HSPA4免费代测试剂

70kDa热休克蛋白1样蛋白ELISA试剂盒 HSPA1L免费代测试剂
糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒50管/24样碱性磷酶(AKP/ALP)测试盒/分光光度法

100T/48S碱性磷酶(AKP/ALP)测试盒/微量法

150ml碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒

50管/48样碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒/比色法

96T碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒/微板法

48T碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒/微板法

50管/24样碱性木聚糖酶(BAX)测试盒/分光光度法

100管/48样碱性木聚糖酶(BAX)测试盒/微量法

50管/48样焦磷:果糖-6-磷-1-磷转移酶(PFP)测试盒/分光光度法
注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。


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