糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒

商品详情：
测定意义：

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶，使糖原分子从非还原端逐个断开α-1，4-糖苷键移去葡萄糖基，释放1-磷酸葡萄糖，直至临近糖原分子α-1，6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5，-AMP)存在下可被激活。

测定原理：

GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH，在340nm下测定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5，-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性，未添加腺苷酸(5，-AMP)时测定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

Ⅱ类主要组织相容性复合体DQβ1ELISA试剂盒 MHCDQβ1免费代测试剂

Ⅰ类主要组织相容性复合体GELISA试剂盒 MHCG免费代测试剂

Ⅰ类主要组织相容性复合体EELISA试剂盒 MHCE免费代测试剂

Ⅰ类主要组织相容性复合体CELISA试剂盒 MHCC免费代测试剂

9kDa信号识别颗粒ELISA试剂盒 SRP9免费代测试剂

98kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP98免费代测试剂

93kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP93免费代测试剂

8-羟基鸟糖苷酶1ELISA试剂盒 OGG1免费代测试剂

88kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP88免费代测试剂

85kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 NUP85免费代测试剂

7-脱氢还原酶ELISA试剂盒 DHCR7免费代测试剂

70kDa热休克蛋白结合蛋白1ELISA试剂盒 HSPBP1免费代测试剂

70kDa热休克蛋白9ELISA试剂盒 HSPA9免费代测试剂

70kDa热休克蛋白4ELISA试剂盒 HSPA4免费代测试剂

70kDa热休克蛋白1样蛋白ELISA试剂盒 HSPA1L免费代测试剂
糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒50管/24样碱性磷酶(AKP/ALP)测试盒/分光光度法

100T/48S碱性磷酶(AKP/ALP)测试盒/微量法

150ml碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒

50管/48样碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒/比色法

96T碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒/微板法

48T碱性磷酶(ALP/AKP)测试盒/微板法

50管/24样碱性木聚糖酶(BAX)测试盒/分光光度法

100管/48样碱性木聚糖酶(BAX)测试盒/微量法

50管/48样焦磷：果糖-6-磷-1-磷转移酶(PFP)测试盒/分光光度法
注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。