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L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒

简要描述:

L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒是合成AsA的主要途径。Gal LDH位于线粒体内膜,负责催化植物体内AsA生物合成的最后一步,也是该途径的关键酶之一,对植物体内AsA含量的积累起着至关重要的作用。

更新时间:2024-04-09;厂商性质:经销商;览量:771

商品详情:
L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒测定意义:

L-半乳糖途径是合成AsA的主要途径。Gal LDH位于线粒体内膜,负责催化植物体内AsA生物合成的最后一步,也是该途径的关键酶之一,对植物体内AsA含量的积累起着至关重要的作用。

货号

规格

检测方法

YSH3223

100管/96样

微量法

YSH3223-1

50管/48样

可见分光光度法

测定原理:

Gal LDH催化L-半乳糖内酯还原细bao色素C(Cyt c),还原型Cyt c在550nm有吸收峰;测定还原型Cyt c增加速率,来计算Gal LDH活性。

自备仪器和用品:

台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取:

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。

半抑制剂7ELISA试剂盒 CST7免费代测试剂

半抑制剂6ELISA试剂盒 CST6免费代测试剂

半抑制剂5ELISA试剂盒 CST5免费代测试剂

半抑制剂4ELISA试剂盒 CST4免费代测试剂

半抑制剂2ELISA试剂盒 CST2免费代测试剂

半抑制剂11ELISA试剂盒 CST11免费代测试剂

半抑制剂1ELISA试剂盒 CST1免费代测试剂

斑联蛋白ELISA试剂盒 ZYX免费代测试剂

白细胞特异性转录因子1ELISA试剂盒 LST1免费代测试剂

白细胞免疫球蛋白样受体亚家族A成员3ELISA试剂盒 LILRA3免费代测试剂

白细胞关联免疫球蛋白样受体2ELISA试剂盒 LAIR2免费代测试剂

白细胞关联免疫球蛋白样受体1ELISA试剂盒 LAIR1免费代测试剂

白三烯A4ELISA试剂盒 LTA4免费代测试剂

白介su9受体ELISA试剂盒 IL9R免费代测试剂

白介su4诱导蛋白1ELISA试剂盒 IL4I1免费代测试剂
L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒转氢酶-2测试盒/微量法100管/96样

总氨基(T-AA)测试盒/比色法80管/78样

总超氧化物歧化酶(SOD)测试盒/WST-1法48T

总超氧化物歧化酶(SOD)测试盒/WST-1法96T

总超氧化物歧化酶(T-SOD)测试盒/羟胺法50管/48样

总超氧化物歧化酶(T-SOD)测试盒/羟胺法100管/96样

(TC)含量测试盒/分光光度法50管/48样

(TC)含量测试盒/微量法100T/96S

总蛋白(TP)测试盒/考马斯亮蓝法100管/96样


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