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双缩脲法蛋白含量测试盒

简要描述:

双缩脲法蛋白含量测试盒强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。

更新时间:2024-04-09;厂商性质:经销商;览量:732

商品详情:
双缩脲法蛋白含量测试盒

货号

规格

检测方法

YSH3396

100管/96样

微量法

YSH3396-1

50管/48样

可见分光光度法

测定原理

强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。

试剂组成和配置

1、双缩脲试剂×1瓶,4℃保存;

2、10mg/ml标准蛋白×1支,-20℃保存;

3、标准蛋白配制:取10mg/ml标准蛋白100μl加双蒸水100μl,即得5mg/ml标准蛋白溶液。
样品中AA提取:

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。

Consortin蛋白ELISA试剂盒 CNST免费代测试剂

Collybistin蛋白ELISA试剂盒 CB免费代测试剂

Codanin1蛋白ELISA试剂盒 CDAN1免费代测试剂

Cochlin蛋白ELISA试剂盒 COCH免费代测试剂

C-Mer原癌基因激酶ELISA试剂盒 MERTK免费代测试剂

Clock同源物ELISA试剂盒 CLOCK免费代测试剂

Clavesin2蛋白ELISA试剂盒 CLVS2免费代测试剂

Clavesin1蛋白ELISA试剂盒 CLVS1免费代测试剂

Claspin蛋白ELISA试剂盒 CLSPN免费代测试剂

Clarin3蛋白ELISA试剂盒 CLRN3免费代测试剂

Clarin2蛋白ELISA试剂盒 CLRN2免费代测试剂

Clarin1蛋白ELISA试剂盒 CLRN1免费代测试剂

Citron蛋白ELISA试剂盒 CIT免费代测试剂

cGMP依赖性蛋白激酶ⅠELISA试剂盒 PRKG1免费代测试剂

Cereblon蛋白ELISA试剂盒 CRBN免费代测试剂
双缩脲法蛋白含量测试盒100T/96S果糖1,6二磷(FDP)测试盒/微量法

50管/48样果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶测试盒/分光光度法

100管/96样果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶测试盒/微量法

50管/48样果糖1,6二磷醛缩酶(FBA)测试盒/分光光度法

100T/96S果糖1,6二磷醛缩酶(FBA)测试盒/微量法

50管/48样果糖-6-磷果糖激酶(PFK)/6-磷果糖激酶/果糖-6-磷激酶测试盒/分光光度法

100管/96样果糖-6-磷果糖激酶(PFK)/6磷果糖激酶/果糖6磷激酶测试盒/微量法

50管/48样果糖测试盒/比色法

50管/48样果糖含量测试盒/分光光度法


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